پروژه بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما در گوساله‌ها و بزهای به روش PCR

با کلیک بر روی پرداخت آنلاین، به صفحه پرداخت هدایت خواهید شد و بعد از پرداخت از طریق کارت های اعتباری بانکی ، لینک دانلود فعال شده و می توانید فایل مورد نظر خود را دانلود کنید.

• 

  پروژه بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما در گوساله‌ها و بزهای به روش PCR

  دسته :

  دامپزشکی

  فرمت/ورد تعداد صفحات 250

  قیمت : 8000 تومان

::

توضیحات بیشتر در مورد پروژه بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما در گوساله‌ها و بزهای به روش PCR :

بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله‌ها و بزهای کشتارشده به روش PCR

فهرست

عنوان …………………………………………………..

الف- مقدمه………………………………………. ۱

ب-چکیده…………………………………………. ۳

فصل اول:کلیات …………………………………… ۵                                                                                                                  

۱- تاریخچه  …………………………………… ۶                                                                                                              

۲- خصوصیات کلی مایکوپلاسما…………………………. ۶

۳- مقاومت مایکوپلاسماها…………………………… ۸

۴- طبقه بندی مایکوپلاسماها………………………… ۹

۵- طبقه بندی کلاستر مایکوئیدس……………………… ۱۲

۶- فیلوژنی……………………………………… . ۱۴

۷- ساختمان ……………………………………. ۱۵

۱-۷-ساختمان مایکوپلاسما مایکوئیدس …………………… ۱۵

۲-۷- ساختمان مایکوپلاسما کاپری کولوم ………………. ۱۷

۸- بیولوژی مولکولی………………………………. ۱۹

۹- توالی‌های تکراری………………………………. ۲۳

۱۰- پروتئینهای سطحی……………………………… ۲۵

۱۱- فاکتور حدت………………………………….. ۳۰

۱۲- آنالیز پروتئین …………………………….. ۳۲

۱۳- طبقه بندی سویه‌ها ……………………………. ۳۴

۱۴- مشخصات گونه مایکوئیدس………………………… ۳۵

۱۵- کشت و رشد گونه مایکوئیدس …………………….. ۳۸

۱۶- کشت و رشد گونه کاپری کولوم …………………… ۴۱

۱-۱۶- محیط Thiacourt ……………………………… 41

۱۷- بیماری پلوروپنومونی واگیر گاوان……………….. ۴۴

۱-۱۷- علائم بالینی ……………………………….. ۴۵                                      

۲-۱۷- علائم کالبدگشایی بیماری ……………………… ۴۷

۳-۱۷- پاتوژنز …………………………………… ۵۰

۱-۳-۱۷- مکانیسمهای مقابله با دستگاه ایمنی…………… ۵۳

۴-۱۷- اختصاصیت میزبان…………………………….. ۵۷

۵-۱۷- انتقال بیماری …………………………….. ۵۸

۶-۱۷- سیر همه گیری ………………………………. ۵۹

۱-۶-۱۷- مخزن…………………………………….. ۵۹    

۲-۶-۱۷- راه انتقال……………………………….. ۵۹

۷-۱۷- پیشگیری و کنترل…………………………….. ۶۰

۱-۷-۱۷- اقدامات لازم برای حفاظت مناطق عاری از بیماری….. ۶۱

۲-۷-۱۷- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری………………. ۶۲

۳-۷-۱۷- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی…………….. ۶۳

۱۸- بیماری پلوروپنومونی واگیر بزان ……………….. ۶۳

۱-۱۸- علائم بالینی ……………………………….. ۶۴

۲-۱۸- علائم کالبد گشایی……………………………. ۶۶

۱۹- گونه مایکوپلاسما کاپریکولوم کاپریکولوم………….. ۶۹

۱-۱۹- سندروم MASKePs…………………………….. 70

۲-۱۹- علائم بالینی………………………………… ۷۱

۳-۱۹- علائم کالبد گشایی……………………………. ۷۱

۴-۱۹- سندروم آگالاکتیه واگیر……………………….. ۷۳  

۲۰- گونه مایکوپلاسما کاپری ……………………….. ۷۳

۱-۲۰- بیماریزایی ………………………………… ۷۳

۲-۲۰- علائم کالبد گشایی……………………………. ۷۴

۲۱- سیر همه‌گیری………………………………… ۷۵

۱-۲۱-مخزن……………………………………… .. ۷۵

۲-۲۱-راه انتقال………………………………… ۷۶

۳-۲۱-جمعیت میزبان………………………………. ۷۷

۲۲-پیشگیری وکنترل ……………………………… ۷۷

۱-۲۲- اقدامات لازم برای محافظت مناطق عاری از بیماری…. ۷۷

۲-۲۲- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری………………. ۷۸

۳-۲۲- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی…………….. ۷۸

۲۳-واکسن…………………………………………. ۷۹

۱-۲۳-واکسن MmmLC ……………………………… 79

۲-۲۳-واکسن Mccp ………………………………… 79

۳-۲۳-واکسن Mcc ………………………………… 79 79-اختصاصیت میزبان در کلاستر مایکوئیدس ……………… …….   ۸۰

۲۵-تشخیص افتراقی……………………………….. ۸۰

۱-۲۵-شناسایی عامل بیماری زا …………………….. ..      ۸۱

۱-۱-۲۵-بررسی میکروسکوپیک اگزودای ریه از طریق تهیه اسمیر یا برش بافتی     ۸۱

۲-۲۵- تشخیص آزمایشگاهی …………………………. ۸۱

۱-۲-۲۵- روش کشت و جداسازی………………………… ۸۱

۱-۱-۲-۲۵- انتخاب نمونه ها ………………………….. ۸۲

۲-۱-۲-۲۵- آماده سازی نمونه ها …………………….   ۸۲

۳-۲۵- تستهای بیوشیمی……………………………. ۸۳

۴-۲۵- روشهای سرولوژی……………………………. ۸۵

۱-۴-۲۵- عوامل موثر در آزمایشات سرولوژی ………………     ۸۵

۲-۴-۲۵- تست مهاری رشد ……………………………. ۸۷

۳-۴-۲۵- تست ایمونو فلورسانس ……………………….. ۸۸

۴-۴-۲۵- تست رسوب ژلی…………………………….. .. ۸۸

۵-۴-۲۵- تست فیکساسیون کامپلمان …………………….. ۸۹

۶-۴-۲۵- تست ممانعت از هماگلوتیناسیون ……………….. ۸۹

۷-۴-۲۵- تست آگلوتیناسیون لاتکس…………………….. ۹۰

۸-۴-۲۵- تست الیزای رقابتی………………………… ۹۱

۹-۴-۲۵- سایر تستهای تشخیصی……………………….. ۹۴

۵-۲۵ – مشکلات روشهای سنتی………………………… ۹۴

۶-۲۵- تشخیص با استفاده از PCR……………………. 95

فصل دوم: روش کار

۲۶- روش کار …………………………………… ۱۰۱

۱-۲۶- جمع آوری نمونه ……………………………… ۱۰۱

۱-۱-۲۶- مواد لازم………………………………….. ۱۰۱

۲-۱-۲۶- بخش جمع آوری نمونه……………………….. ۱۰۱

۳-۱-۲۶- نمونه برداری ……………………………. ۱۰۳

۲-۲۶- کشت و جداسازی نمونه ها……………………… ۱۰۴

۱-۲-۲۶- مواد لازم ……………………………….. ۱۰۴

۲-۲-۲۶- طرز تهیه محیط کشت اختصاصی برای جداسازی مایکوپلاسمای نشخوار کنندگان         ۱۰۶

۱-۲-۲-۲۶- مواد لازم ……………………………… ۱۰۶

۲-۲-۲-۲۶- روش تهیه محیط کشت…………………………. ۱۰۷

۳-۲۶- استخراج DNA مایکوپلاسما…………………….. ۱۰۹

۱-۳-۲۶- روش استخراج DNA از نمونه های ارسالی………….. ۱۰۹

۴-۲۶- فرایند PCR ………………………………. 110

۱-۴-۲۶- مواد لازم ……………………………….. ۱۱۰

۲-۴-۲۶- آماده سازی مواد جهت واکنش PCR ………………. 112

۱-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA نمونه‌ها ……………….. ۱۱۲

۲-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA کلونیهای جدا شده………… ۱۱۵

۳-۲-۴-۲۶- تهیه مخلوط اصلی اولیه…………………… ۱۱۵

۳-۴-۲۶- پرایمرها………………………………… ۱۱۵

۴-۲۶- واکنش PCR………………………………… 117

۵-۲۶- تهیه ژل الکتروفورز ……………………….. ۱۱۸

۱-۵-۲۶- طرز تهیه محلول اتیدیوم برماید ………………. ۱۱۹

۶-۲۶- الکتروفورز …………………………………. ۱۲۱

۷-۲۶- رویت باندهای ایجاد شده ……………………. ۱۲۲

فصل سوم: نتایج

۲۷- نتایج …………………………………….. .. ۱۲۴

۱-۲۷- جداسازی………………………………….. ۱۲۴

۱-۱-۲۷- بررسی عملکرد محیط کشت…………………….. ۱۲۴

۲-۱-۲۷- نتایج کشت نمونه های ارسالی ……………….. ۱۲۴

۱-۲-۱-۲۷- نتایج روز پنجم ……………………….. ۱۲۵

۲-۲-۱-۲۷- نتایج روزهفتم تا دهم……………………. ۱۲۵

۳-۲-۱-۲۷- نتایج روزپانزدهم……………………….. ۱۲۶

۲-۲۷- نتایج PCR ………………………………… 126

۱-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر جنس ………… ۱۲۶

۲-۲-۲۷- تائید کلونی های جدا شده…………………… ۱۲۷

۳-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر کلاستر مایکوئیدس. ۱۲۷

۴-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه آگالاکتیه… ۱۲۸

۵-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه مایکوئیدس کلونی بزرگ          ۱۲۹

۳-۲۷- نتایج کالبد گشایی…………………………. ۱۳۰

۱-۳-۲۷- معیار انتخاب ……………………………. ۱۳۰

فصل چهارم: بررسی نتایج

نمودارها…………………………………………. ۱۳۱

فصل پنجم: بحث

۲۸- بحث …………………………………………. ۱۳۹  

۱-۲۸- ضایعات کالبد گشایی…………………………… ۱۳۹

۲-۲۸- میزان وقوع عفونت تنفسی مایکوپلاسما ………….. ۱۴۱

۳-۲۸- روش کشت………………………………….. ۱۴۲

۴-۲۸- روش PCR ………………………………… 147    

۵-۲۸- فراوانی گونه ها ………………………….. ۱۵۲

۲۹- خلاصه انگلیسی……………………………….. ۱۵۹

۳۰- منابع …………………………………….. .. ۱۶۰

فهرست تصاویر

عنوان  …………………………………………………………

تصویر شماره ۱: کلونی تخم مرغی شکل مایکوپلاسما پس از سومین ساب کالچر ۱۲۵

تصویر شماره ۲: آزمایش PCR برای تشخیص جنس مایکوپلاسما در نمونه ریه   ۱۲۷

تصویر شماره ۳: آزمایش PCR برای تشخیص کلاستر مایکوئیدس در نمونه ریه       ۱۲۸

تصویر شماره ۴: آزمایش PCR برای تشخیص گونه آگالاکتیه درنمونه ریه                   ………………………………………                            ………………………………………                            ………………………………………                            ………………………………………               ۱۲۹

تصویر شماره ۵: آزمایش PCR برای تشخیص گونه مایکوئیدس مایکوئیدس کلونی بزرگ ۱۳۰

فهرست جداول

عنوان  ……………………………………………………………………….

جدول۱: طبقه بندی مایکوپلاسما……………………….. ۱۱

جدول ۲: معرفی اعضا کلاستر مایکوئیدس و خصوصیات بیماریزایی آنها  ۱۱

جدول ۳: احتیاجات غذایی برای رشد مایکوپلاسماهای کلاستر مایکوئیدس  ۳۹

جدول ۴ : مقادیر موردنیاز جهت تهیه مخلوط اصلی اولیه…. ۱۱۲

جدول ۵: مواد مورد نیاز واکنش تکثیر ………………. ۱۱۴

جدول۶ : پرایمرهای استفاده شده در واکنش تکثیر ……… ۱۱۶

جدول ۷ : برنامه واکنش پرایمرها ………………….. ۱۱۸

جدول۸: : فرمول تهیه محیط TBE(5X)…………………. 120

جدول۹: میزان اتیدیوم بروماید مصرفی جهت ساختن مقادیر متفاوت ژل ۱۲۰

فهرست نمودارها

عنوان ……………………………………………………………………

نمودار شماره ۱: درصد مایکوپلاسمای جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسی

گله‌های مورد مطالعه…………………………….          ۱۳۲

نمودارشماره ۲: درصد حضور مایکوپلاسما درعفونت تنفسی گله‌های مورد

مطالعه به روشPCR …………………………….. 132

نمودار شماره۳ : مقایسه روشهای کشت و PCR در تشخیص مایکوپلاسما ی موجود در عفونت تنفسی گله‌های مورد مطالعه…………………. ۱۳۳

نمودار شماره۴: مقایسه نتایج کشت وPCR نمونه‌ها در گله‌های مورد مطالعه (n=100)     ۱۳۳

نمودار شماره ۵: مقایسه نتایج کشت و PCR مایکوپلاسما در گاو (n=50)    ۱۳۴

نمودار شماره ۶: مقایسه نتایج کشت و PCR مایکوپلاسما در گله های گوسفند (n=30) 134

نمودار شماره ۷: مقایسه نتایج کشت و PCR در گله‌های بز (n=20)     ۱۳۵

نمودار شماره۸: نمودار شماره ۸:مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های مورد مطالعه (n=100) ………… 135

نمودار شماره ۹: نمودار شماره۹:مقایسه نتایج ایجاد کدورت در محیط براث و جداسازی مایکوپلاسما در گله‌های مورد مطالعه (n=100) …. 136

نمودار شماره ۱۰: نمودار شماره۱۰: مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR   مایکوپلاسما
در گله‌های گاو(n=50)……………………………. 136

نمودار شماره ۱۱: نمودار شماره ۱۱:مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما
در گله‌های بز (n=20)……………………………. 137

نمودار شماره۱۲: مقایسه نتایج تشکیل کدورت در محیط براث و PCR مایکوپلاسما در گله‌های گوسفند (n=30) …………………………. 137

پروژه بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما در گوساله‌ها و بزهای به روش PCR

قیمت : 8000 تومان

[ بلافاصله بعد از پرداخت لینک دانلود فعال می شود ]